Real-time quantification of proteins secreted of conditioned media from mesenchymal stromal cells (MSC) in co-culture with hematopoietic progenitor cells

Abstract

The interaction of mesenchymal stromal cells (MSC) in co-cultures with hematopoietic progenitor cells (HPC) in ex-vivo models induce the secretion of pro-inflammatory protein factors and influences HPC cell proliferation and differentiation processes. Different studies have shown the quantification of these biomarkers in other conditioned media using an ELISA and Luminex™ type immunoassay format. In this paper, we developed real-time quantification of biomarkers in conditioned media of these cells in co-cultures from bone marrow, umbilical cord blood, and Wharton's jelly sources using surface plasmon resonance imaging (SPRi). We show the detection and quantification of CCL2, CCL5, bFGF, IL-6, IL-8 and VEGF proteins with high sensitivity and specificity. SPRi can be used with a real-time analysis methodology and could be considered a tool for biomarker assays. © 2023 The Authors

La interacción de células estromales mesenquimales (MSC) en cocultivos con células progenitoras hematopoyéticas (HPC) en modelos ex vivo induce la secreción de factores proteicos proinflamatorios e influye en los procesos de proliferación y diferenciación de células HPC. Diferentes estudios han demostrado la cuantificación de estos biomarcadores en otros medios condicionados utilizando un formato de inmunoensayo tipo ELISA y Luminex™. En este artículo, desarrollamos la cuantificación en tiempo real de biomarcadores en medios condicionados de estas células en cocultivos de médula ósea, sangre de cordón umbilical y fuentes de gelatina de Wharton utilizando imágenes por resonancia de plasmón superficial (SPRi). Mostramos la detección y cuantificación de las proteínas CCL2, CCL5, bFGF, IL-6, IL-8 y VEGF con alta sensibilidad y especificidad. SPRI se puede utilizar con una metodología de análisis en tiempo real y podría considerarse una herramienta para ensayos de biomarcadores. © 2023 Los Autores